3.1 方案設計思路
本方案以“精準成像-場景適配-定量可靠”為核心設計原則，結合WD-9433A多功能凝膠成像系統的技術參數（如激發波長范圍254nm-635nm、CCD分辨率500萬像素、動態范圍4.8OD等）與不同實驗場景的成像需求，從樣本預處理、設備參數調試、圖像分析方法三個維度構建應用方案：
- 樣本適配預處理：針對不同類型樣本的光學特性，制定專屬預處理流程。核酸凝膠樣本采用高純度染色劑（如GoldView、EB替代染料）進行均勻染色，控制染色時間與洗脫強度避免背景干擾；蛋白印跡膜采用封閉液封閉非特異性結合位點，優化一抗、二抗孵育條件確保信號特異性；微生物菌落樣本采用透明培養基培養，保證菌落形態完整且與培養基對比度適宜。
- 設備參數精準調試：根據樣本類型與檢測目標設置個性化成像參數。核酸凝膠檢測中，254nm波長用于雙鏈DNA成像，激發強度調至80%以平衡靈敏度與背景；蛋白印跡檢測采用488nm激發波長匹配熒光二抗，曝光時間根據信號強度在0.1s-10s范圍內動態調整；菌落計數采用白光透射模式，調節焦距與光圈使菌落邊緣清晰。同時開啟設備“自動背景校正”功能消除環境光干擾。
- 圖像分析規范建立：建立“標準曲線校準-區域選擇-數據校驗”分析流程。定量分析前通過標準品繪制線性標準曲線，核酸定量以已知濃度的λ-DNA為標準，蛋白定量以BSA標準品為參照；圖像分析時精準選擇目標區域，排除雜帶與背景干擾；對分析數據進行重復性校驗，確保定量結果的可靠性。
3.2 分場景應用方案
3.2.1 分子克隆場景——核酸凝膠電泳成像與片段定量
應用需求：分子克隆實驗中，需對PCR產物、酶切片段進行成像分析，明確片段大小與濃度，確保連接反應中目的基因與載體的摩爾比適宜（通常為3:1），要求片段大小判定誤差≤5%，濃度定量誤差≤8%。方案配置：WD-9433A凝膠成像系統+紫外透射臺+1.0%瓊脂糖凝膠+核酸染料（GoldView）+λ-DNA標準品（100-10000bp）。操作步驟：① 制備1.0%瓊脂糖凝膠，加入GoldView染料（終濃度0.5μg/mL），將PCR產物（20μL）與標準品（5μL）分別點樣，120V電泳30min；② 開啟WD-9433A，選擇紫外透射模式，激發波長254nm，激發強度80%，曝光時間1.5s，進行成像；③ 利用配套軟件分析圖像，通過標準品標注片段大小，繪制濃度標準曲線計算PCR產物濃度。
3.2.2 蛋白印跡場景——目的蛋白成像與定量分析
應用需求：蛋白印跡實驗中，需檢測目的蛋白（如GAPDH、β-actin內參蛋白）的表達量，評估藥物處理對蛋白表達的影響，要求目的蛋白條帶信號清晰，定量結果線性相關系數≥0.995，平行樣本相對偏差≤5%。方案配置：WD-9433A凝膠成像系統+熒光檢測模塊+PVDF膜+熒光二抗（Alexa Fluor 488標記）+BSA標準品。操作步驟：① 蛋白樣本經SDS-PAGE電泳后轉印至PVDF膜，5%脫脂奶封閉1h，一抗（1:1000稀釋）4℃孵育過夜，熒光二抗（1:5000稀釋）室溫孵育1h；② 開啟WD-9433A熒光模式，激發波長488nm，發射波長520nm，曝光時間2.0s，進行成像；③ 以BSA標準品（0.1-5μg）繪制標準曲線，軟件分析目的蛋白條帶灰度值，計算蛋白表達量。
3.2.3 微生物實驗場景——菌落成像與自動計數
應用需求：微生物計數實驗中，需對平板菌落進行精準計數，評估樣品中微生物含量（如食品微生物檢測、環境微生物篩查），要求計數速度≤30s/平板，計數誤差≤3%，可區分直徑≥0.5mm的單菌落。方案配置：WD-9433A凝膠成像系統+白光反射臺+LB固體培養基平板+梯度稀釋的大腸桿菌菌液。操作步驟：① 將大腸桿菌菌液梯度稀釋（10??-10??），取100μL涂布于LB平板，37℃培養18h；② 開啟WD-9433A白光反射模式，調節焦距至菌落清晰，光圈5.6，曝光時間0.5s，進行平板成像；③ 啟用軟件“自動菌落計數”功能，設置最小菌落直徑0.5mm，手動修正重疊菌落與雜質干擾，記錄計數結果。
