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智能細胞粉碎機SCIENTZ-950E在不同生物樣本高效破碎中的應用及效能評估
上海儀器網(wǎng) / 2025-11-21

 

一、方案背景與需求分析

在分子生物學、微生物學、免疫學及生物制藥等領域,生物樣本的高效、徹底破碎是后續(xù)核酸提取、蛋白純化、代謝物分析等實驗的關鍵前置步驟。傳統(tǒng)細胞破碎設備普遍存在破碎效率低、樣本間差異大、操作繁瑣、溫控精度不足等問題,尤其對于高難度破碎樣本(如真菌孢子、革蘭氏陽性菌)或微量珍貴樣本,難以兼顧破碎效果與樣本活性保留。
智能細胞粉碎機SCIENTZ-950E基于超聲波破碎原理,結(jié)合智能控制系統(tǒng)與精準溫控技術(shù),旨在解決傳統(tǒng)設備的痛點。本方案針對細菌、真菌、動物組織、植物組織4類典型生物樣本,系統(tǒng)探究SCIENTZ-950E的最優(yōu)破碎參數(shù),量化評估其破碎效能及對后續(xù)實驗的影響,為生物實驗室樣本前處理提供標準化解決方案。

二、方案核心設備:智能細胞粉碎機SCIENTZ-950E特性

SCIENTZ-950E作為一款智能型細胞破碎設備,其核心特性為破碎效能與樣本保護提供了技術(shù)支撐,主要參數(shù)與功能如下:
  • 超聲功率調(diào)節(jié):0-950W連續(xù)可調(diào),支持脈沖模式(脈沖時間1-99s,間隔時間1-99s),適配不同硬度樣本;
  • 溫控系統(tǒng):內(nèi)置高精度溫度傳感器(精度±0.5℃),實時監(jiān)測樣本溫度,當溫度超過設定閾值(可設范圍0-60℃)時自動降低功率或暫停工作,避免高溫導致樣本變性;
  • 智能程序存儲:可預設10組破碎程序,支持一鍵調(diào)用,減少操作誤差;
  • 樣本適配范圍:適配0.5-50mL樣本,配備不同規(guī)格超聲探頭(6mm、10mm、15mm),滿足微量與大量樣本需求;
  • 安全保護:具備過流、過溫、空載保護功能,保障實驗安全與設備壽命。

三、實驗設計與方法

3.1 實驗樣本

選取4類實驗室常用生物樣本,均為對數(shù)生長期或新鮮制備樣本,具體如下:
  1. 革蘭氏陰性菌:大腸桿菌(E. coli DH5α),OD600=1.0,菌液濃度約1×10^9 CFU/mL;
  2. 革蘭氏陽性菌:金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),OD600=0.8,菌液濃度約8×10^8 CFU/mL;
  3. 真菌:釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),菌液濃度約5×10^7 CFU/mL;
  4. 動物組織:小鼠肝臟組織,新鮮制備成10%(w/v)組織勻漿;
  5. 植物組織:菠菜葉片,新鮮制備成5%(w/v)組織勻漿。

3.2 實驗分組與參數(shù)設置

以“破碎效率”“樣本活性保留率”為核心評價指標,設置不同超聲功率、破碎時間、脈沖參數(shù),通過預實驗篩選各樣本的最優(yōu)參數(shù)范圍,最終確定實驗組參數(shù)如下,同時以傳統(tǒng)超聲破碎儀(SCIENTZ-650,非智能型)作為對照組。
樣本類型
SCIENTZ-950E參數(shù)(最優(yōu))
對照組參數(shù)(SCIENTZ-650)
大腸桿菌
功率300W,脈沖3s/間隔2s,時間3min,溫控25℃
功率300W,連續(xù)破碎3min,無溫控
金黃色葡萄球菌
功率500W,脈沖5s/間隔3s,時間5min,溫控20℃
功率500W,連續(xù)破碎5min,無溫控
釀酒酵母
功率600W,脈沖4s/間隔2s,時間4min,溫控18℃
功率600W,連續(xù)破碎4min,無溫控
小鼠肝臟組織
功率400W,脈沖2s/間隔1s,時間2min,溫控4℃
功率400W,連續(xù)破碎2min,無溫控
菠菜葉片組織
功率450W,脈沖3s/間隔2s,時間3min,溫控25℃
功率450W,連續(xù)破碎3min,無溫控

3.3 檢測指標與方法

  1. 破碎效率: 細菌/真菌:采用平板計數(shù)法,計算破碎后存活菌數(shù)占初始菌數(shù)的比例,破碎效率=(1-存活菌比例)×100%;
  2. 組織樣本:采用考馬斯亮藍法測定破碎后上清液中總蛋白濃度,以蛋白溶出量反映破碎效率,同時通過顯微鏡觀察組織細胞破碎完整性。
  3. 樣本活性保留率: 蛋白活性:以乳酸脫氫酶(LDH)為指示酶,測定破碎后上清液中LDH活性,與標準活性相比計算保留率;
  4. 核酸完整性:提取破碎樣本中的總DNA,通過瓊脂糖凝膠電泳觀察DNA條帶清晰度,以無明顯降解為活性保留合格標準。
  5. 溫度變化:實時記錄實驗過程中樣本溫度變化,對比兩組設備的溫控效果。

四、實驗結(jié)果與分析

4.1 不同樣本的破碎效率對比

SCIENTZ-950E對5類生物樣本均表現(xiàn)出優(yōu)異的破碎效率,且顯著高于傳統(tǒng)對照組,具體結(jié)果如下表所示:
樣本類型
SCIENTZ-950E破碎效率
對照組破碎效率
效率提升幅度
大腸桿菌
99.2±0.3%
92.5±1.2%
7.2%
金黃色葡萄球菌
98.5±0.5%
85.3±2.1%
15.5%
釀酒酵母
97.8±0.4%
88.1±1.5%
11.0%
小鼠肝臟組織
上清蛋白濃度12.8±0.6 mg/mL
上清蛋白濃度8.3±0.4 mg/mL
54.2%
菠菜葉片組織
上清蛋白濃度6.5±0.3 mg/mL
上清蛋白濃度3.7±0.2 mg/mL
75.7%
分析可知,SCIENTZ-950E對結(jié)構(gòu)堅韌的革蘭氏陽性菌(金黃色葡萄球菌)和真菌(釀酒酵母)的破碎效率提升尤為顯著,這得益于其脈沖破碎模式——脈沖間隔可避免局部能量過度集中導致的探頭空化效應,同時讓樣本充分接觸超聲場,提升破碎均勻性。對于植物組織這類含有細胞壁和纖維結(jié)構(gòu)的樣本,其高效破碎效果則與精準的功率調(diào)節(jié)和溫控保護相關,避免了組織蛋白因高溫凝固而影響溶出。

4.2 樣本活性保留率結(jié)果

樣本活性保留是衡量細胞破碎設備性能的關鍵指標,尤其對后續(xù)蛋白純化和酶活分析至關重要。實驗結(jié)果顯示,SCIENTZ-950E的溫控系統(tǒng)有效保障了樣本活性,具體數(shù)據(jù)如下:
  1. 蛋白活性保留:以小鼠肝臟組織中的LDH活性為指標,SCIENTZ-950E組LDH活性保留率為92.3±1.8%,而對照組因破碎過程中樣本溫度從初始4℃升至38℃,LDH活性保留率僅為65.7±2.5%,差異極顯著(P<0.01)。對于大腸桿菌破碎后的胞內(nèi)酶(β-半乳糖苷酶),SCIENTZ-950E組活性保留率為88.5±2.1%,對照組為70.2±3.0%,進一步證明其溫控系統(tǒng)的有效性。
  2. 核酸完整性:提取5類樣本破碎后的總DNA,瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示,SCIENTZ-950E組所有樣本的DNA條帶清晰、無拖尾,表明DNA未發(fā)生降解;而對照組中金黃色葡萄球菌、菠菜葉片組織的DNA條帶出現(xiàn)明顯拖尾,提示高溫和過度破碎導致核酸斷裂。

4.3 溫度變化對比

實驗過程中樣本溫度變化直接反映設備的溫控能力。SCIENTZ-950E組所有樣本的溫度波動均控制在設定閾值±1℃范圍內(nèi),例如小鼠肝臟組織破碎過程中溫度始終維持在4-5℃,菠菜葉片組織溫度穩(wěn)定在25-26℃;而對照組所有樣本均出現(xiàn)明顯升溫,其中金黃色葡萄球菌破碎5min后溫度升至42℃,釀酒酵母破碎4min后溫度升至35℃,遠超生物樣本活性耐受范圍(一般為0-25℃)。這一結(jié)果表明,其內(nèi)置的溫度傳感器和智能功率調(diào)節(jié)系統(tǒng)形成了閉環(huán)控制,當溫度接近閾值時,設備自動降低超聲功率或延長脈沖間隔,從源頭避免了熱損傷。

五、方案優(yōu)勢與應用建議

5.1 方案核心優(yōu)勢

  • 高效性與通用性:適配細菌、真菌、動植物組織等多種樣本,破碎效率較傳統(tǒng)設備提升7.2%-75.7%,尤其適用于高難度破碎樣本;
  • 智能與精準:預設程序減少操作誤差,脈沖模式和功率調(diào)節(jié)實現(xiàn)破碎參數(shù)個性化匹配,溫控精度±0.5℃保障樣本活性;
  • 安全與穩(wěn)定:過流、過溫、空載保護功能降低實驗風險,設備連續(xù)運行8h無故障,滿足批量樣本處理需求。

5.2 應用場景建議

  1. 分子生物學實驗室:用于基因組DNA提取、RNA提取及胞內(nèi)蛋白純化的樣本前處理,尤其適合微量珍貴樣本(如臨床活檢組織);
  2. 微生物學研究:針對耐藥菌、極端環(huán)境微生物等難破碎菌株的破碎,為代謝組學和蛋白組學分析提供高質(zhì)量樣本;
  3. 生物制藥領域:用于疫苗生產(chǎn)中病毒載體破碎、重組蛋白表達工程菌的胞內(nèi)產(chǎn)物提取,保障產(chǎn)物活性和純度;
  4. 農(nóng)業(yè)與食品檢測:用于植物病原菌檢測、食品微生物快速檢測中的樣本破碎,提升檢測靈敏度。

 

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